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Evaluaci�n de t�cnicas para la obtenci�n y medici�n de Flavonoides Totales en Fragaria spp

 

Evaluation of techniques for obtaining and measuring total flavonoids in Fragaria spp

 

Avalia��o de t�cnicas de obten��o e dosagem de flavonoides totais em Fragaria spp

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Correspondencia: magdaliz_so@hotmail.com

 

Ciencias T�cnicas y Aplicadas

Art�culo de Investigaci�n

 

 

* Recibido: 19 de abril de 2025 *Aceptado: 25 de mayo de 2025 * Publicado: �18 de junio de 2025

 

        I.            Master en Gen�tica Molecular, Ingeniera Bioqu�mica, Universidad de Buenos Aires, Investigador, Argentina.

      II.            Master en Qu�mica Aplicada con especializaci�n en Qu�mica Molecular y Qu�mica de Materiales, Ingeniero en Alimentos, Universidad T�cnica de Ambato, Docente Investigador FCIAB, Ecuador.

   III.            Magister en Qu�mica menci�n en Qu�mica F�sica, Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE Sede Latacunga, Ecuador.

   IV.            Magister en Ingenier�a de Organizaci�n y Producci�n, Universidad Central del Ecuador, Ecuador.

Resumen

El presente estudio evalu� t�cnicas para extraer y medir flavonoides totales en hojas de Fragaria spp. (fresa), compuestos reconocidos por sus propiedades antioxidantes y beneficios para la salud. El objetivo fue determinar la t�cnica m�s eficiente y r�pida para obtener flavonoides totales. Se probaron tres m�todos de extracci�n: maceraci�n, incubadores de microplacas y ultrasonido, utilizando solventes como metanol 100% y mezclas etanol: agua (75:25). La cuantificaci�n se realiz� mediante espectrofotometr�a UV-Vis utilizando quercetina como est�ndar. La metodolog�a incluy� el procesamiento de hojas liofilizadas y pulverizadas, extracci�n con diferentes solventes y condiciones, y la medici�n de flavonoides mediante reacciones con cloruro de aluminio. El ultrasonido result� ser el m�todo m�s eficiente, obteniendo 167,57 mg QT/g en solo 5 minutos con etanol: agua (75:25). La maceraci�n, aunque efectiva con metanol puro, requiri� tiempos prolongados (96 horas) para alcanzar 165,35 mg QT/g. Por su parte, la t�cnica de microplacas fue menos eficiente, logrando 101,14 mg QT/g con metanol puro. En conclusi�n, el ultrasonido con solventes hidroalcoh�licos ofrece una combinaci�n �ptima de eficiencia y sostenibilidad, posicion�ndose como el m�todo preferido para aplicaciones industriales y anal�ticas, debido a su rapidez, rendimiento y consistencia.

Palabras claves: Flavonoides; extracto; solvente; Fragaria spp.

 

Abstract

This study evaluated techniques for extracting and measuring total flavonoids in Fragaria spp. (strawberry) leaves, compounds recognized for their antioxidant properties and health benefits. The objective was to determine the most efficient and rapid technique for obtaining total flavonoids. Three extraction methods were tested: maceration, microplate incubators, and ultrasound, using solvents such as 100% methanol and ethanol:water mixtures (75:25). Quantification was performed by UV-Vis spectrophotometry using quercetin as a standard. The methodology included processing freeze-dried and pulverized leaves, extraction with different solvents and conditions, and measurement of flavonoids by reactions with aluminum chloride. Ultrasound proved to be the most efficient method, obtaining 167.57 mg QT/g in just 5 minutes with ethanol:water (75:25). Maceration, although effective with pure methanol, required prolonged times (96 hours) to achieve 165.35 mg QT/g. The microplate technique, on the other hand, was less efficient, achieving 101.14 mg QT/g with pure methanol. In conclusion, ultrasound with hydroalcoholic solvents offers an optimal combination of efficiency and sustainability, positioning itself as the preferred method for industrial and analytical applications due to its speed, performance, and consistency.

Keywords: Flavonoids; extract; solvent; Fragaria spp.

 

Resumo

Este estudo avaliou t�cnicas de extra��o e mensura��o de flavonoides totais em folhas de Fragaria spp. (morango), compostos reconhecidos por suas propriedades antioxidantes e benef�cios � sa�de. O objetivo foi determinar a t�cnica mais eficiente e r�pida para obten��o de flavonoides totais. Tr�s m�todos de extra��o foram testados: macera��o, incubadoras de microplacas e ultrassom, utilizando solventes como metanol 100% e misturas etanol:�gua (75:25). A quantifica��o foi realizada por espectrofotometria UV-Vis utilizando quercetina como padr�o. A metodologia incluiu o processamento de folhas liofilizadas e pulverizadas, extra��o com diferentes solventes e condi��es e mensura��o de flavonoides por rea��es com cloreto de alum�nio. O ultrassom demonstrou ser o m�todo mais eficiente, obtendo 167,57 mg QT/g em apenas 5 minutos com etanol:�gua (75:25). A macera��o, embora eficaz com metanol puro, exigiu tempos prolongados (96 horas) para atingir 165,35 mg QT/g. A t�cnica de microplacas, por outro lado, foi menos eficiente, atingindo 101,14 mg QT/g com metanol puro. Em conclus�o, o ultrassom com solventes hidroalco�licos oferece uma combina��o ideal de efici�ncia e sustentabilidade, posicionando-se como o m�todo preferido para aplica��es industriais e anal�ticas devido � sua velocidade, desempenho e consist�ncia.

Palavras-chave: Flavonoides; extrato; solvente; Fragaria spp.

 

Introducci�n

La creciente demanda de antioxidantes naturales ha impulsado la investigaci�n sobre fuentes vegetales ricas en compuestos bioactivos. Las hojas de Fragaria spp. (fresa) contienen flavonoides con propiedades antioxidantes beneficiosas para la salud humana. Sin embargo, la efectividad de los m�todos de extracci�n y medici�n de estos compuestos var�a seg�n el m�todo empleado. Este estudio se motiv� por la necesidad de identificar m�todos �ptimos que permitan una extracci�n y medici�n m�s eficientes de los flavonoides totales en hojas de fresa.

El problema abordado radica en la falta de consenso sobre cu�l es la t�cnica m�s efectiva para extraer y cuantificar flavonoides en Fragaria spp. Diversos m�todos, como la maceraci�n, el ultrasonido y la agitaci�n, han sido utilizados con resultados variables. La ausencia de un protocolo estandarizado dificulta la comparaci�n efectiva de resultados entre investigaciones y reduce las posibilidades de llevar estos procesos al �mbito industrial (Agostini et al., 2004).

Se ha documentado que los flavonoides poseen actividades antioxidantes, antiinflamatorias y anticancer�genas, llevando al desarrollo de diversas metodolog�as para su extracci�n y cuantificaci�n en plantas. Por ejemplo, se ha desarrollado una t�cnica mejorada optimizando recursos para la obtenci�n simult�nea de polifenoles y flavonoides totales a partir de hojas de Fragaria spp. evaluando variables como el tipo de disolvente, temperatura y tiempo de extracci�n (Sailema Ortiz et al., 2023). Sin embargo, la eficiencia de estas t�cnicas puede variar significativamente dependiendo de las condiciones espec�ficas empleadas.

Este estudio se justifica por la necesidad de establecer un m�todo eficiente, reproducible y sostenible para la extracci�n y cuantificaci�n de flavonoides en hojas de Fragaria spp. La identificaci�n de una t�cnica �ptima no solo facilitar�a la investigaci�n cient�fica, sino que tambi�n podr�a tener aplicaciones industriales en la producci�n de antioxidantes naturales.

T�cnicas de Extracci�n de Flavonoides en Fragaria spp.

La eficiencia en la extracci�n de flavonoides depende de factores como el solvente utilizado, el m�todo de extracci�n y las condiciones espec�ficas del proceso. Entre las t�cnicas m�s empleadas se encuentran:

�        Extracci�n S�lido-L�quido (ESL): Consiste en utilizar solventes org�nicos para extraer los flavonoides de la matriz vegetal. La elecci�n del solvente es crucial: por ejemplo, mezclas hidroalcoh�licas han demostrado ser efectivas en la extracci�n de compuestos fen�licos y flavonoides (Jurado-D�vila et al., 2020).

�        Agitadores/incubadores de microplacas: Se ha consolidado como una t�cnica eficiente para la extracci�n y cuantificaci�n de flavonoides en diversas matrices vegetales. Estos dispositivos permiten el procesamiento simult�neo de m�ltiples muestras en condiciones controladas de temperatura y agitaci�n, optimizando la liberaci�n de compuestos bioactivos y mejorando la reproducibilidad de los resultados (Delgado, 2015).

�        Extracci�n Asistida por Ultrasonido (EAU): Es un m�todo avanzado que emplea ultrasonidos para generar cavitaci�n en el solvente, facilitando la ruptura de las paredes celulares y mejorando la extracci�n de compuestos bioactivos. Esta metodolog�a ofrece ventajas significativas sobre la maceraci�n tradicional, incluyendo tiempos de extracci�n m�s cortos y una mayor eficiencia en la recuperaci�n de flavonoides (Corona-Jim�nez et al., 2016).

Una vez extra�dos, es fundamental cuantificar los flavonoides totales presentes en las muestras de Fragaria spp. El m�todo m�s com�nmente usado es la Espectrofotometr�a UV-Vis que est� basada en la formaci�n de complejos coloreados entre los flavonoides y reactivos espec�ficos, permite la cuantificaci�n a trav�s de la absorbancia medida en el espectrofot�metro. Este m�todo es ampliamente utilizado debido a su simplicidad y rapidez (Velasco, 2017).

Al evaluar las t�cnicas de extracci�n y cuantificaci�n de flavonoides en Fragaria spp., es importante considerar la selecci�n del solvente, donde la eficacia de la extracci�n depende de la polaridad del solvente. Solventes como el metanol y el etanol, o sus mezclas con agua, son com�nmente utilizados debido a su capacidad para extraer una amplia gama de flavonoides. De igual manera, factores como la temperatura, la duraci�n del proceso y la proporci�n entre s�lido y l�quido influyen en la eficacia de la extracci�n. La optimizaci�n de estos par�metros es esencial para maximizar la recuperaci�n de flavonoides (Jurado-D�vila et al., 2020).

Es fundamental asegurar que los m�todos de cuantificaci�n sean espec�ficos, sensibles y reproducibles para garantizar la precisi�n en la medici�n de los flavonoides totales (Velasco, 2017).

La evaluaci�n de t�cnicas para la obtenci�n y medici�n de flavonoides totales en Fragaria spp. ha avanzado significativamente en los �ltimos a�os, incorporando m�todos m�s eficientes y sostenibles. La elecci�n adecuada de las t�cnicas de extracci�n y cuantificaci�n, junto con la optimizaci�n de las condiciones de proceso, es crucial para obtener resultados precisos y reproducibles en la investigaci�n de estos compuestos bioactivos.

El prop�sito de este estudio fue analizar y comparar la eficiencia de diferentes t�cnicas de extracci�n y cuantificaci�n de flavonoides totales en hojas de Fragaria spp. para determinar el m�todo m�s efectivo y sostenible.

 

Materiales y m�todos

Balones aforados de 5, 10, 25, 50 y 100 mL, frascos est�riles de 100 mL, vasos de precipitados de 100 y 250 mL, probetas de 10 y 100 mL, un recipiente de vidrio de 10 mL, pipetas, varilla de agitaci�n, micropipetas de volumen fijo y variable, esp�tulas, celda de cuarzo para espectrofot�metro, gradilla, mortero y pistilo de cer�mica, pl�stica para tubos Eppendorf, tubos de microcentr�fuga de 2 mL (Eppendorf), rotuladores, Parafilm, bol�grafos, l�pices, bolsas herm�ticas, mascarillas, guantes, toallas absorbentes, bit�cora y cron�metro.

Equipos

Ba�o de ultrasonido (BRANSON 2800, M�xico), microcentr�fuga refrigerada (BUNSEN FINSEN-R 1800RPM 24088XG, Espa�a), balanza anal�tica (METTLER TOLEDO XPE204, USA), estufa (BINDER ED 240L, Alemania), espectrofot�metro UV-VISIBLE (Thermo Scientific Evolution 201, Espa�a), y refrigeradora −4�C (LG GS65SPP1, Ecuador).

Reactivos

Quercetina hidratada 95,0% (ACROS ORGANICS, New Yersey, USA), Nitrito de sodio 98,0% (LOBA CHEMIE, Mumbai, India), Cloruro de aluminio 99,0% (LOBA CHEMIE, Mumbai, India),� Hidróxido de sodio 99,0% (MERCK EMSURE, Darmstadt, Alemania), agua Milli-Q, Metanol, alcohol et�lico absoluto.

Metodolog�a para la evaluaci�n t�cnicas de obtenci�n de flavonoides totales

Las hojas liofilizadas de fresas fueron trituradas con un mortero y tamizados en una malla N�60 para obtener un polvo fino homog�neo y fueron almacenadas para su posterior an�lisis, puesto que el tama�o de part�cula es crucial en la evaluaci�n de estas t�cnicas.

Extracci�n S�lido-L�quido

Estudios previos han demostrado que solventes como una mezcla de etanol y agua en proporci�n 75:25 y metanol puro al 100% presentan una mayor eficiencia de extracci�n comparados con otros solventes (etanol puro, metanol:agua 75:25 y agua pura). Con base en estos hallazgos, se seleccionaron como los solventes m�s adecuados para esta investigaci�n. En un recipiente pl�stico est�ril de 100 mL, se colocaron 2,5 g de polvo de hojas de fresa con 25 mL del solvente seleccionado, manteni�ndose en maceraci�n durante 24 y 96 horas. Tras este periodo, las muestras fueron centrifugadas durante 5 minutos a 420 rpm, se recolect� el sobrenadante y se evapor� en una estufa a 40�C el solvente durante dos horas. Los extractos obtenidos se ajustaron a un volumen final de 10 mL utilizando agua Milli-Q y se almacenaron en frascos de vidrio de 10 mL a una temperatura de 4�C hasta su an�lisis. Cada experimento se realiz� en triplicado.

 

 

Extracci�n con Agitadores/incubadores de microplacas

Se pesaron 0,1 g de hojas secas en tubos de microcentr�fuga de 2 mL y se a�adieron 1 mL del solvente elegido (etanol:agua en proporci�n 75:25 y metanol al 100%). Las muestras se transfirieron a los pocillos de una microplaca incubando a 50�C con agitaci�n durante 5 minutos para facilitar la liberaci�n de flavonoides. Posteriormente, los extractos fueron centrifugados a 3869 rpm durante 5 minutos. El sobrenadante recolectado se evapor� en una estufa a 40�C durante dos horas. El residuo seco resultante se diluy� hasta un volumen final de 5 mL con agua Milli-Q y se almacen� a 4�C para su an�lisis posterior. Cada procedimiento se realiz� por triplicado.

Extracci�n Asistida por Ultrasonido (EAU)

Se midi� 1mL de disolvente y 0,1 g de polvo de hojas, las muestras fueron centrifugadas durante 5 minutos a 3869 rpm, el sobrenadante recolectado se someti� a un proceso de evaporaci�n) a 40�C durante dos horas. Finalmente, el residuo obtenido se afor� hasta un volumen de 5 mL utilizando agua Milli-Q y se almacen� a 4�C para su posterior an�lisis. Cada procedimiento se realiz� por triplicado.

Cuantificaci�n de Flavonoides Totales (FnT)

Este procedimiento se basa en la formaci�n de complejos entre los flavonoides y el ion aluminio, lo que produce un cambio en la absorbancia medible espectrofotom�tricamente. Se combinan 250 μL del extracto con 150 μL de una soluci�n de NaNO2 al 5%, y se deja incubar por 4 minutos. Luego, se a�aden 300 μL de AlCl3 al 10%. Despu�s de 5 minutos, se incorpora 1 mL de NaOH 1 M y se ajusta el volumen a 5 mL con agua Milli-Q. El contenido de FnT se mide en triplicado utilizando la ecuaci�n 1, comparando directamente la se�al de las muestras con la se�al de los est�ndares de QT (Sailema Ortiz, 2019).

Para llevarlo a cabo, se disuelve una cantidad conocida de la muestra en etanol al 60% y se a�ade una soluci�n de cloruro de aluminio al 2% en etanol absoluto. Tras agitar y dejar reposar la mezcla, se mide la absorbancia a 510 nm (Montan� Ojeda et al., 2021). La concentraci�n de flavonoides se calcula comparando con una curva de calibraci�n elaborada con quercetina como est�ndar. Se combinan 250 μL del extracto con 150 μL de NaNO2 al 5% y se incuban por 6 minutos. Luego, se incorporan 300 μL de AlCl3 al 10%, 5 minutos, se agrega 1 mL de NaOH 1 M y se ajusta el volumen a 5 mL con agua Milli-Q. La mezcla se agita y se deja reposar antes de medir la absorbancia a 510 nm. La concentraci�n de flavonoides se calcula utilizando una curva de calibraci�n obtenida con quercetina como est�ndar. El contenido de FnT se mide por triplicado (Sailema Ortiz, 2019).

Donde:

FnT: Flavonoides totales expresados en mg QT/g de hoja seca

: Absorbancia medida a 510 nm

: Pendiente e intercepto de la recta de regresi�n de calibraci�n con QT

: Factor de diluci�n

: gramos de hoja seca empleada

 

Resultados y discusi�n

La cuantificaci�n de flavonoides totales se realiz� utilizando el

Mediante el m�todo del cloruro de aluminio se cuantific� los flavonoides totales, que es reconocido por su alta sensibilidad y especificidad hacia los flavonoides. Para asegurar la exactitud en la medici�n, se construy� una curva de calibraci�n usando quercetina como compuesto est�ndar. Primero, se prepar� una soluci�n madre con una concentraci�n de 3200 mg/L, garantizando su uniformidad mediante agitaci�n continua. A partir de esta soluci�n, se realizaron diluciones seriadas en intervalos adecuados para generar puntos de calibraci�n, cubriendo un rango de concentraciones entre 30 y 200 mg/L.

El an�lisis espectrofotom�trico permiti� observar una respuesta lineal entre la absorbancia medida y la concentraci�n de quercetina dentro del rango evaluado. Este comportamiento confirma la linealidad del m�todo en las condiciones establecidas, lo que es esencial para su aplicaci�n en la cuantificaci�n de flavonoides totales. Los datos obtenidos se ajustaron mediante una regresi�n lineal, generando una ecuaci�n que describe la relaci�n directa entre ambas variables, con un coeficiente de determinaci�n (R�) elevado, indicativo de la calidad del ajuste.

La Figura 1 presenta una curva de calibraci�n representativa. La ecuaci�n de la recta de regresi�n obtenida se utiliz� para determinar el contenido de flavonoides totales (FnT) en hojas de fresa, expres�ndose los resultados en t�rminos de miligramos de quercetina (mg de QT) por gramo de hoja seca.

Figura 1.� Curva de calibraci�n para flavonoides totales

 

Este enfoque es de gran utilidad en estudios fitoqu�micos y proporciona una base confiable para evaluar las concentraciones de flavonoides en diferentes matrices vegetales. Adem�s, la precisi�n y reproducibilidad del m�todo lo hacen adecuado para su aplicaci�n en investigaciones comparativas o de caracterizaci�n en diversas especies.

La elecci�n del m�todo de extracci�n m�s adecuado se bas� en encontrar la t�cnica que posibilitara la m�xima recuperaci�n de compuestos, al tiempo que se optimizaban los recursos y el tiempo requerido para su implementaci�n. Seg�n diversos estudios, la extracci�n con solventes representa una etapa inicial crucial en el an�lisis de flavonoides, ya que permite preparar las muestras para los procesos posteriores de cuantificaci�n, purificaci�n, separaci�n y caracterizaci�n (Jurado-D�vila et al., 2020).

La estabilidad de los compuestos fen�licos, como los flavonoides, est� altamente influenciada por las condiciones de extracci�n, incluyendo par�metros como la temperatura, la polaridad del solvente y el tiempo de exposici�n. Estas condiciones no solo afectan la eficiencia de extracci�n, sino tambi�n la conservaci�n de las propiedades bioactivas de los compuestos obtenidos(Cruzalegui et al., 2021). Por ello, la elecci�n de las condiciones �ptimas es clave para garantizar rendimientos elevados y la integridad de los compuestos extra�dos.

La cuantificaci�n de flavonoides totales en hojas secas de fresa puede variar significativamente seg�n el m�todo de extracci�n, el disolvente utilizado y las condiciones espec�ficas del proceso. En este contexto, la Figura 2 detalla las variables de respuesta consideradas en la comparaci�n de la eficiencia de extracci�n entre las tres metodolog�as estudiadas, lo que permiti� evaluar aspectos como la cantidad de compuesto recuperado cabe mencionar que estudios anteriores se establecieron temperaturas optima de extracci�n� la cual fue de 50�C, adem�s se han evaluado otros solventes estableciendo que� los m�s eficientes son etanol: agua 75:25 y el metanol 100% (Sailema Ortiz et al., 2023).

 

Figura 2.� Curva de calibraci�n para flavonoides totales

 

La maceraci�n es un m�todo tradicional que implica la inmersi�n prolongada del material vegetal en un disolvente. Los resultados muestran que el tiempo prolongado de maceraci�n (96 horas) con metanol puro arroj� una mayor cantidad de flavonoides (165,35 � 0,57 mg QT/g hoja seca) en comparaci�n con 24 horas (163,04 � 0,39 mg QT/g), aunque la diferencia no es significativa. Esto indica que la extracci�n alcanza un estado cercano a la saturaci�n alrededor de las 24 horas.

Por otro lado, el uso de una mezcla de etanol:agua 75:25 disminuy� la eficiencia de extracci�n (157,38 � 0,45 mg QT/g en 96 horas y 143,67 � 0,47 mg QT/g en 24 horas). Esto puede atribuirse a que el agua reduce la capacidad del metanol para disolver flavonoides altamente apolares. Por lo tanto, la maceraci�n requiere tiempos largos (24-96 horas), lo cual puede ser una limitaci�n en entornos industriales o de investigaci�n donde el tiempo es un recurso cr�tico. Aunque el m�todo es simple y efectivo con metanol 100%, los tiempos prolongados no justifican la leve mejora en la extracci�n observada al pasar de 24 a 96 horas.

El m�todo de incubadores de microplacas result� ser el menos eficiente que los otros, obteniendo las concentraciones m�s bajas: 101,14 � 1,29 mg QT/g con metanol puro y 90,79 � 0,58 mg QT/g con etanol:agua 75:25. Aunque es r�pido (10 minutos) a diferencia de la maceraci�n, parece no permitir una adecuada liberaci�n de los compuestos de las matrices celulares.

Con el m�todo de ultrasonido result� se obtuvo un excelente rendimiento en un tiempo muy corto (5 minutos). El uso de una mezcla etanol:agua 75:25 produjo la mayor concentraci�n de flavonoides totales (167,57 � 0,16 mg QT/g hoja seca), superando incluso a la maceraci�n prolongada. Esto se debe a que el ultrasonido facilita la ruptura celular y la difusi�n del disolvente, mejorando la extracci�n. Estudios han demostrado que la extracci�n asistida por ultrasonido puede ser altamente eficiente para compuestos fen�licos. Con este m�todo se logra extracciones eficientes en solo 5 minutos. Se aprovecha las ondas ultras�nicas para romper las paredes celulares del material vegetal, facilitando la liberaci�n de flavonoides. Esto concuerda con estudios que destacan la efectividad del ultrasonido para la extracci�n r�pida y eficiente de compuestos bioactivos.

El metanol 100% mostr� ser m�s efectivo en la mayor�a de los m�todos, especialmente en maceraci�n. Sin embargo, el uso de mezclas hidroalcoh�licas (como etanol:agua 75:25) en el ultrasonido result� superior, probablemente debido a la mejora en la polaridad del disolvente, lo que facilita la solubilizaci�n de diferentes tipos de flavonoides.

Estudios previos sugieren que los disolventes hidroalcoh�licos, como etanol:agua y etanol:agua, son efectivos para extraer una amplia gama de compuestos fen�licos, adem�s de ser m�s seguros y sostenibles en comparaci�n con disolventes puros

 

Conclusi�n

El an�lisis de los resultados obtenidos demuestra que la elecci�n del m�todo de extracci�n y el disolvente son factores clave para maximizar la recuperaci�n de flavonoides totales en hojas secas. Entre los m�todos evaluados, el ultrasonido durante 5 minutos utilizando una mezcla de etanol:agua (75:25) produjo la mayor cantidad de flavonoides extra�dos (167,57 � 0,16 mg QT/g hoja seca), superando a otros m�todos en eficiencia y tiempo. Este resultado destaca la capacidad del ultrasonido para romper las paredes celulares del material vegetal y mejorar la transferencia de masa, lo que facilita la liberaci�n de compuestos bioactivos.

En comparaci�n, la maceraci�n con metanol 100% mostr� buenos rendimientos, alcanzando 165,35 � 0,57 mg QT/g en 96 horas. Sin embargo, los tiempos prolongados requeridos limitan su practicidad para aplicaciones donde el tiempo es un recurso cr�tico. Adem�s, la disminuci�n de rendimiento al usar una mezcla de etanol:agua (75:25) en la maceraci�n evidencia que este m�todo es menos sensible a la optimizaci�n del disolvente (Wong-Paz et al., 2020).

El m�todo de incubaci�n en microplacas durante 10 minutos fue el menos eficiente, extrayendo solo 101,14 � 1,29 mg QT/g con metanol 100%. Esto sugiere que este enfoque no es adecuado para la extracci�n de flavonoides, especialmente cuando se comparan los resultados con los m�todos m�s eficientes.

El uso de disolventes hidroalcoh�licos, como etanol:agua (75:25), demostr� ser especialmente efectivo en combinaci�n con ultrasonido, superando incluso al metanol puro en este caso. Esto resalta la importancia de ajustar la polaridad del disolvente para maximizar la solubilidad de diferentes tipos de flavonoides (Ri et al., 2016).

Por lo tanto, el ultrasonido con etanol:agua (75:25) se posiciona como el m�todo m�s adecuado para la cuantificaci�n de flavonoides totales debido a su alta eficiencia, menor tiempo de procesamiento y resultados consistentes. Este m�todo es una alternativa prometedora para aplicaciones tanto anal�ticas como industriales, donde el balance entre rendimiento, tiempo y costo es fundamental.

 

Recomendaciones

�        Se recomienda usar solventes hidroalcoh�licos, como etanol:agua (75:25), que ofrecen alta eficiencia y sostenibilidad ambiental en comparaci�n con solventes puros.

�        Este m�todo debe priorizarse en entornos industriales debido a su capacidad para extraer flavonoides r�pidamente, maximizando el rendimiento en menor tiempo y con menor consumo de recursos.

�        Futuros estudios podr�an evaluar la aplicabilidad del ultrasonido en matrices vegetales diferentes y explorar su escalabilidad para operaciones a gran escala, optimizando costos y resultados.

 

Referencias

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